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ELISA实验方法之竞争法检测抗体


发布日期:[2019-07-11] 共阅[57]次

    科研小伙伴们,又和大家见面了,今天我们给大家分析的是ELISA实验方法之竞争法检测抗体,在之前的文章里面,已经为大家介绍了竞争法检测抗原、双抗原夹心法检测抗体、双抗体夹心法、间接法检测抗体等ELISA实验方法,不知道您大家是否还有印象呢?如果没有印象的话没有关系,查阅我们之前更新的文章就好了,如您在这其中有其他疑问的话,可以前来咨询我司技术人员哦!

竞争法检测抗体

竞争法测抗体的反应模式与竞争法测抗原类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。当抗原材料中的干扰物质不易除去,或不易得到足够的纯化抗原时,可用此法检测特异性抗体。其原理为标本中的抗体和一定量的酶标抗体竞争与固相抗原结合。标本中抗体量越多,结合在固相上的酶标抗体愈少,因此阳性反应呈色浅于阴性反应。如抗原为高纯度的,可直接包被固相。竞争法测抗体有多种模式,可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合,抗HBc ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合,洗涤后再加入酶标抗体,与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此法。

竞争法的简要操作步骤:
1)先加入特异性抗原,使抗原固定结合于载体表面;
2)加入梯度浓度比例的待测样品与酶标抗体混合物,并做只加酶标抗体的对照组;
3)加入酶促反应底物,发生显色反应,对比实验组及对照组的显色差异,计算未知抗体的量。

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